माइक्रोबियल विश्लेषण के चार मुख्य तरीकों में वृद्धि माप, माइक्रोबियल गिनती, शारीरिक सूचकांक और स्मीयर माइक्रोस्कोपी शामिल हैं।
विकास माप
आयतन माप: सूक्ष्मजीवों की वृद्धि की स्थिति संस्कृति माध्यम की एक निश्चित मात्रा में हाइपहे की मात्रा को मापकर परिलक्षित होती है। यह विधि सरल और तेज़ है, लेकिन त्रुटि बड़ी है।
शुष्क वजन विधि: सूक्ष्मजीवों का सूखा वजन सेंट्रीफ्यूजेशन या निस्पंदन द्वारा निर्धारित किया जाता है। यह विधि अधिक बोझिल है और आमतौर पर इसका उपयोग तब किया जाता है जब माइक्रोबियल उत्पाद एक जीवाणु कोशिका होती है, जैसे सूखा खमीर, चारा, आदि।
टर्बिडिमेट्री: सूक्ष्मजीवों की वृद्धि की स्थिति निर्धारित करने के लिए एक निश्चित तरंग दैर्ध्य पर अवशोषण मूल्य को पराबैंगनी स्पेक्ट्रोफोटोमीटर द्वारा मापा जाता है। इस विधि का उपयोग मुख्य रूप से किण्वन उद्योग में जीवाणु विकास की निगरानी के लिए किया जाता है।
माइसेलियम लंबाई माप: फिलामेंटस कवक और कुछ एक्टिनोमाइसेट्स के लिए, एक निश्चित अवधि के भीतर हाइपहे वृद्धि की लंबाई को संस्कृति माध्यम पर मापा जा सकता है।
माइक्रोबियल गिनती विधि
हेमोसाइटोमीटर विधि: सरल, सहज और त्वरित, लेकिन केवल एकल-कोशिका सूक्ष्मजीवों या फिलामेंटस सूक्ष्मजीवों द्वारा उत्पादित बीजाणुओं की गिनती के लिए उपयुक्त है, और परिणामों में मृत और जीवित बैक्टीरिया शामिल हैं।23।
दाग गिनती विधि: मृत कोशिकाओं को जीवित कोशिकाओं से अलग करने के लिए न्यूट्रल रेड, ट्रिपैन ब्लू और मिथाइल ब्लू जैसे रंगों का उपयोग करें।
तरल तनुकरण विधि: अज्ञात जीवाणु नमूने का दस गुना क्रमिक तनुकरण करें, संस्कृति के बाद प्रत्येक तनुकरण पर वृद्धि के साथ परीक्षण ट्यूबों की संख्या रिकॉर्ड करें, और फिर नमूने के तनुकरण गुणक के आधार पर जीवित जीवाणु सामग्री की गणना करें। यह विधि अधिक बोझिल है, लेकिन जीवित जीवाणुओं की संख्या की गणना की जा सकती है।
प्लेट कॉलोनी गिनती विधि: पतला जीवाणु समाधान को एक ठोस संस्कृति माध्यम पर फैलाएं, और संस्कृति के बाद मूल जीवाणु समाधान में बैक्टीरिया की संख्या की गणना करें। यह विधि जीवित बैक्टीरिया के बारे में जानकारी प्राप्त कर सकती है, लेकिन ऑपरेशन बोझिल है और इसके लिए एक निश्चित मात्रा में संस्कृति समय की आवश्यकता होती है।
शारीरिक सूचक विधि
नाइट्रोजन सामग्री का निर्धारण: अधिकांश बैक्टीरिया की नाइट्रोजन सामग्री शुष्क वजन का 12.5% है। नाइट्रोजन सामग्री को मापकर सूक्ष्मजीवों की वृद्धि स्थिति को अप्रत्यक्ष रूप से प्रतिबिंबित किया जा सकता है।
कार्बन सामग्री का निर्धारण: एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य पर अवशोषण को मापने के लिए K2Cr2O7 समाधान का उपयोग करें, वृद्धि मात्रा की गणना करने के लिए एक मानक वक्र बनाएं।
चीनी को कम करने की विधि: कम करने वाली चीनी की मात्रा को मापकर सूक्ष्मजीवों की वृद्धि की स्थिति को प्रतिबिंबित करें, जिसका उपयोग अक्सर बड़े पैमाने पर औद्योगिक किण्वन उत्पादन में किया जाता है।
अन्य शारीरिक पदार्थों का निर्धारण: जिसमें न्यूक्लिक एसिड, एटीपी और अन्य सामग्री, साथ ही एसिड उत्पादन, गैस उत्पादन, ऑक्सीजन की खपत, गर्मी उत्पादन और अन्य संकेतक शामिल हैं।
धब्बा माइक्रोस्कोपी
स्मीयर माइक्रोस्कोपी बैक्टीरिया, कोशिका विज्ञान, एंजाइम बैक्टीरिया, माइक्रोफ़िलारिया और कोलेस्ट्रॉल क्रिस्टल की जांच करने की एक विधि है। स्मीयर तैयार करके और उन्हें माइक्रोस्कोप के नीचे देखकर, सूक्ष्मजीवों की आकृति विज्ञान और संरचना को सहजता से समझा जा सकता है
